طريقة منظمة الصحة العالمية لاختبار الحساسية للمضادات الحياتية.. انتشار المضاد الحيوي من القرص والعلاقة المستقيمة بين قطر التثبيط ولوغارتم أقل تركيز مثبط لأي بكتريا

طريقة منظمة الصحة العالمية لاختبار الحساسية للمضادات الحياتية WHO method

تعتمد هذه الطريقة على تقرير الدراسة التعاونية الدولية international collaborative study التي قام بها كل من Ericsson  وSherris عام 1971.
حيث ينتشر المضاد الحيوي من القرص والعلاقة المستقيمة بين قطر التثبيط zone inhibition diameter ولوغارتم أقل تركيز مثبط لأي بكتريا تحت الظروف القياسية.
إن كل قرص يجب أن يكون مشربا بتركيز معين من المضاد الحيوي.
ويمكن استنتاج العلاقة مباشرة بين MIC وقطر التثبيط من المنحني التنازلي.

إعداد اختبار الحساسية للمضادات الحياتية:

ويستخدم في هذه الطريقة الوسط الزرعي Mueller Hinton agar والمضاف اليه 5 % من دم الأغنام الخالي من الفبرين يصب هذا الوسط في أطباق ذات قطر يساوي 150 مل.
وكل طبق يحتوي 65 مل من الوسط الزرعي الذي يعطي عمق 4 مل.

حساب المنحني التنازلي:

ويحتسب المنحني التنازلي مجموعة من الأطباق الزرعية تلقح هذه الأطباق بسكب 5 مل من مزارع البكتريا السائلة المخففة على  الوسط الزرعي بصورة منتظمة متساوية.
وتسحب بعد ذلك الكميات السائلة وتلفظ خارجا ثم توضع الأقراص المشربة بالمضادات الحيوية حيث يقرا قطر التثبيط بالمللترات وتقارن بالمنحني المباشر.

قياس التركيز الأدنى المثبط MIC بطريقة القرص:

يمكن قياس أقل تركيز مثبط لأي مضاد حيوي لبكتريا معينة بمعرفة حزام التثبيط للقرص وبالرجوع إلى منحنى قياسي أو الخط التنازلي والذي سبق تحضيره كمرجع ثم يصبح بالإمكان استنتاج العلاقة بين أقل تركيز مثبط وقطر التثبيط.

بكتريا قياسية:

ويمكن استخدام بكتريا قياسية ذات حساسية معلومة للمضادات الحياتية، وتعتمد دقة النتائج على معيار الظروف للتجربة لحساب التركيز المثبط الأدنى للبكتريا تحت الاختبار تطبق المعادلة الآتية:
أقل تركيز مثبط للبكتريا تحت الاختبار = التركيز الأدنى المثبط للبكتريا القياسية.