الصباغة التفريقية (صبغة جرام).. بكتيريا كروية موجبة لصبغة جرام عنقودية. بكتيريا عصوية سالبة لصبغة جرام بكتيريا القولون. بكتيريا عصوية موجبة لصبغة جرام

الصباغة التفريقية (صبغة جرام):

المواد والأدوات اللأزمة:
- محلول الكريستال البنفسجي.
- محلول اليود.
- كحول إثيلى 95%.
- محلول الصفرانين.
- زجاجة غسيل بها ماء مقطر.
- شرائح زجاجية نظيفة.
- لهب بنزن.
- إبر الحقن.

مزارع بكتيرية مختلفة:
- بكتيريا كروية موجبة لصبغة جرام عنقودية Staphylococcus.
- بكتيريا عصوية سالبة لصبغة جرام بكتيريا القولون Escherichiacoli.
- بكتيريا عصوية موجبة لصبغة جرام  Bacillus.

خطوات العمل:

1- حضر غشاء بكتيرى من المزرعة النامية على أنابيب الأجار المائل أو على أطباق الأجار المغذى أو من مزرعة سائلة .

2- ثبت الغشاء بإستعمال اللهب وتأكد مع عدم تعرض الغشاء للحرارة العالية.

3- غط الغشاء بمحلول الكريستال البنفسجى وأتركه لمدة دقيقة واحدة.

4- اغسل الغشاء بإحتراس بالماء المقطر الموجود فى زجاجة الغسيل بحيث لا يوجه الماء مباشرة الى الغشاء حتى لا يتسبب فى إزالته من على الشريحة ويجب أن تكون الشريحة بشكل مائل أثناء الغسل.

5- غط الغشاء قبل أن يجف بمحلول اليود وأتركه لمدة دقيقة واحدة.

6- أغسل بالكحول الأثيلى (95%) ولا تدع الكحول يوجه مباشرة للغشاء. أستمر بالغسيل حتى تلاحظ تقريباً عدم تلون الكحول المتساقط من على الشريحة.

7- بسرعة ورفق أغسل بالماء ثم غط الغشاء بعد ذلك بمحلول الصفرانيين لمدة نصف دقيقة.

8- اغسل بالماء المقطر كما سبق ثم جفف بورق ترشيح كما هو متبع وأفحص بإستعمال العدسة الزيتية. ودون نتائجك فى كراس العمل.