تقنية الصباغة البسيطة في علم الأحياء الدقيقة: خطوات تفصيلية لتجهيز وفحص الشرائح المصبوغة وتلوين وتحديد الخلايا المجهرية

ما هي الصباغة البسيطة؟

الصباغة البسيطة Simple Staining هي طريقة صبغ سريعة وسهلة تستخدم لتلوين الخلايا البكتيرية، مما يجعلها أكثر وضوحًا تحت المجهر. تستخدم هذه التقنية صبغة واحدة فقط، وهي عادةً ما تكون صبغة قاعدية مثل أزرق الميثيلين.

مبادئ الصباغة البسيطة:

• الشحنة الكهربائية: تحتوي الخلايا البكتيرية على شحنة سالبة على سطحها، بينما تحتوي الصبغات القاعدية على شحنة موجبة.
• التجاذب الكهرباء: تجذب الشحنات المختلفة بعضها البعض، مما يؤدي إلى ارتباط الصبغة القاعدية بسطح الخلية البكتيرية.
• التلوين: عندما ترتبط الصبغة بالخلية، فإنها تلونها، مما يجعلها مرئية تحت المجهر.

خطوات الصباغة البسيطة:

• تحضير الشريحة:

1. نظف شريحة زجاجية نظيفة وجافة.
2. ضع عليها مسحة رقيقة من عينة البكتيريا المراد فحصها.
3. اترك المسحة تجف في الهواء.
4. ثبت المسحة بتمرير الشريحة بسرعة فوق لهب بنزن.

• تطبيق الصبغة:

1. ضع بضع قطرات من صبغة أزرق الميثيلين على المسحة المثبتة.
2. اترك الصبغة لمدة دقيقة واحدة.

• الشطف والتجفيف:

1. اشطف الشريحة بالماء المقطر لإزالة الصبغة الزائدة.
2. جفف الشريحة بلطف باستخدام منشفة ورقية.

• الفحص المجهري:

1. ضع الشريحة تحت المجهر وابدأ بفحصها باستخدام العدسة الشيئية ذات التكبير المنخفض.
2. ثم انتقل إلى العدسة الشيئية ذات التكبير العالي لفحص التفاصيل الدقيقة للخلايا البكتيرية.

ملاحظات:

• يمكن استخدام صبغات قاعدية أخرى مثل كريستال البنفسج أو سافرانين بدلاً من أزرق الميثيلين.
• الصباغة البسيطة لا تميز بين أنواع مختلفة من البكتيريا، ولكنها تساعد في تحديد شكل وحجم وترتيب الخلايا البكتيرية.
• تعتبر الصباغة البسيطة طريقة مفيدة لفحص البكتيريا بسرعة وسهولة، وتستخدم غالبًا في المختبرات والمستشفيات.

بعد الفحص المجهري:

• سجل ملاحظاتك حول شكل وحجم وترتيب الخلايا البكتيرية التي شاهدتها.
• قم بتنظيف العدسة الزيتية والمجهر بعد الاستخدام.

نصائح:

• تأكد من أن الشرائح نظيفة وجافة قبل الاستخدام.
• لا تستخدم الكثير من الصبغة.
• لا تجفف الشريحة بقوة.
• ابدأ الفحص المجهري دائمًا باستخدام العدسة الشيئية ذات التكبير المنخفض.

باستخدام هذه الخطوات والنصائح، يمكنك إجراء الصباغة البسيطة بنجاح وفحص الخلايا البكتيرية تحت المجهر.