مكونات محلول صبغة جرام:
صبغة جرام تعتمد على عدة محلول لتحقيق هدفها في تمييز البكتيريا إلى موجبة الجرام وسالبة الجرام. تتكون هذه الصبغة من عدة مكونات أساسية، لكل منها وظيفة محددة:
1. الصبغة الأساسية (Crystal Violet):
- الدور: هي أول صبغة يتم تطبيقها على الشريحة. تتلون جميع الخلايا البكتيرية باللون البنفسجي بغض النظر عن نوعها.
- الوظيفة: تعمل على تلوين جميع الخلايا البكتيرية بشكل متساوٍ، مما يهيئها للمرحلة التالية.
2. محلول الموردا (Lugol's iodine):
- الدور: يضاف بعد الصبغة الأساسية. يتكون من اليود واليوديد البوتاسيوم.
- الوظيفة: يعمل على تثبيت الصبغة الأساسية داخل جدار الخلية للبكتيريا موجبة الجرام، مما يجعلها مقاومة لإزالة اللون في الخطوة التالية.
3. مزيل اللون (Decolorizer):
- الدور: عادة ما يكون الكحول الإيثيلي بتركيز 95%.
- الوظيفة: يعمل على إزالة الصبغة الأساسية من جدار الخلية للبكتيريا سالبة الجرام، وذلك بسبب رقة جدارها الخلوي وارتفاع نسبة الدهون فيه. أما البكتيريا موجبة الجرام، فتبقى محتفظة بالصبغة بسبب سمك جدارها الخلوي ووجود طبقة سميكة من الببتيدوجليكان.
4. الصبغة المضادة (Safranin):
- الدور: هي الصبغة الأخيرة التي تضاف.
- الوظيفة: تلون البكتيريا التي فقدت الصبغة الأساسية (سلبية الجرام) باللون الأحمر. أما البكتيريا موجبة الجرام، فتبقى محتفظة باللون البنفسجي.
ملحوظة: تركيبة كل محلول من هذه المحالول قد تختلف قليلاً بين المختبرات المختلفة، ولكن المكونات الأساسية تبقى هي نفسها.
لماذا هذه المكونات بالذات؟
- صبغة الكريستال فايوليت: تتميز بقدرتها على الارتباط بالببتيدوجليكان في جدار الخلية البكتيري، وهو مكون أساسي في جدار الخلية للبكتيريا موجبة الجرام.
- محلول الموردا: يعمل على تكوين مركب غير قابل للذوبان مع صبغة الكريستال فايوليت، مما يزيد من قوة الارتباط بين الصبغة وجدار الخلية.
- الكحول: يعمل على إذابة الدهون في جدار الخلية للبكتيريا سالبة الجرام، مما يسهل إزالة الصبغة.
- صبغة السافرانين: تلون البكتيريا التي فقدت الصبغة الأساسية، مما يساعد على تمييزها عن البكتيريا موجبة الجرام.
لماذا تعتبر صبغة جرام مهمة؟
- التشخيص: تستخدم لتحديد نوع البكتيريا المسببة للعدوى.
- التصنيف: تساعد في تصنيف البكتيريا إلى مجموعتين رئيسيتين: موجبة الجرام وسالبة الجرام.
- دراسة التركيب: توفر معلومات حول تركيب جدار الخلية البكتيرية.
التسميات
سلامة