طريقة تصبيغ الجراثيم.. قتل الجراثيم بعمل الحرارة على تجلط بروتوبلازم الخلية الجرثومية والتصاق الخلية الجرثومية على الشريحة الزجاجية

طريقة التصبيغ
stain method

1- اغمر الشريحة الزجاجية بمحلول الكحول الاثيلي 50% لإزالة الاوساخ والطبقة الشمعية الموجودة على الشريحة ثم امسحها بقطعة قماش نظيفة وجافة.
كما يمكن ان تمرر الشريحة فوق اللهب للتأكد من إزالة الطبقة الشمعية.

2- ضع بواسطة الحلقة الناقلة قطرة صغيرة من المزرعة الجرثومية السائلة على الشريحة الزجاجية أما إذا أخذت الجراثيم من مستعمرة جرثومية نامية على وسط صلب.

ففي البداية توضع قطرة صغيرة من الماء على الشريحة وتمزج مع نقلة صغيرة جدا من المستعمرة الجرثومية.

3- أنشر النقلة على الشريحة لتكوين طبقة رقيقة ويجب الانتباه الى عدم جعل المسحة  سميكة لأنها سوف تكون معتمة للضوء.

4- تجفف المسحة بالهواء او بوضع الشريحة الزجاجية على مجففة الشرائح slide dryer.

5- تثبت المسحة وذلك بتمرير الشريحة الزجاجية ثلاث مرات فوق اللهب وبسرعة معقولة مع الانتباه الى وضع الطبقة الجرثومية إلى الأعلى حيث اذا لم تثبت بصورة جيدة فأن الغشاء المتكون سوف يزال أثناء التصبيغ.

6- تضاف الصبغة المراد استعمالها مثل المثيلين الزرقاء او البنفسج البلوري او السفرانين 

7- تغسل الشريحة بالماء الهادئ ثم تجفف وتفحص بالعدسة الزيتية.

ملاحظة:
إن الغاية من تثبيت الجراثيم هو لقتل الجراثيم حيث تعمل الحرارة على تجلط بروتوبلازم الخلية الجرثومية والتصاق الخلية الجرثومية على الشريحة الزجاجية، مما يؤدي الى تثبيتها على الشريحة وعدم زوالها أثناء معاملتها بالصبغات أو غسلها بالماء.