ناقلة أمين الألانين (ALT):
يوجد بصفة أساسية في الكبد ولكن يوجد بكميات بسيطة في الكليتين والقلب والعضلات والبنكرياس.
يتم قياس ناقلة أمين الألانين لمعرفة ما إذا كان الكبد تالف أو مصاب بالمرض.
وعادة ما توجد مستويات منخفضة من ناقلة أمين الألانين في الدم.
ولكن عندما يكون الكبد تالف أو مصاب بالمرض، فإنه يصدر ناقلة أمين الألانين في مجرى الدم، مما يسبب ارتفاع مستوياتها.
وتحدث معظم الزيادات في مستويات ناقلة أمين الألانين بسبب تلف الكبد.
غالبًا ما يتم إجراء اختبار ناقلة أمين الألانين مع الاختبارات الأخرى المستخدمة لمعرفة تلف الكبد، ومنها ناقلة أمين الأسبارتات (AST) والفسفاتاز القلوي ونازعة هيدروجين اللاكتات والبيليروبين.
وتعتبر مستويات ناقلة أمين الألانين وناقلة أمين الأسبارتات اختبارين موثوقين للوقوف على تلف الكبد.
أسباب ارتفاع ناقلة أمين الألانين:
- إدمان الكحول.
- الأدوية.
- الالتهاب الكبدي الحاد والمزمن.
القاعدة:
التقدير الحركي لنشاط ناقلة أمين الألانين، طريقة ينصح بها الاتحاد الدولي للكيمياء السريرية والطب المختبري (IFCC):
2-oxoglutarate +l-alanine-----ALT-------- glutamate + pyruvate
Pyruvate + NADH + H+-----------LDH------- l-lactate + NAD+
يتحدد معدل استهلاك ثنائي نوكليوتيد النيكوتين والأدنين المختزل (NADH) عن طريق القياس الضوئي ويتناسب بصورة مباشرة مع نشاط ناقلة أمين الألانين في العينة.
العينة:
1- العينة الموصى بها: 100 ميكرولتر من المصل أو بلازما معالجة بالهيبارين أو بلازما EDTA.
قم بجمع العينات باستخدام أسلوب بزل الوريد القياسي.
قد يستخدم الهيبارين كمضاد للتخثر لعينات البلازما.
قم بحفظ العينات في حاويات مغلقة لتجنب حدوث تلوث أو تبخر.
اتبع الاحتياطات العالمية عند القيام بالفصد أو التعامل مع عينات المريض أو ما تم معايرته أو أي منتجات أخرى أساسها هو مصل الدم.
تخلص من المواد الملوثة بالنفايات المسببة للعدوى.
2- أخرج المصل على الفور من الكتلة الدموية.
ويتعين عدم استخدام العينات المنحلة لأن ناقلة أمين الألانين ستتلوث بفعل خلايا الدم الحمراء.
لا تعمد إلى تجميد العينة، لأن هذا سيؤدي إلى فقد نشاط ناقلة أمين الألانين.
3- إذا كان التركيز أكبر من مجال جهاز التحليل قم بالتخفيف بكمية معادلة من ملح متساوي التوتر ثم قم بإعادة التحليل.
قم بضرب النتيجة في 2 لمعرفة نشاط ناقلة أمين الألانين الأصلى.
الكواشف والمواد:
1- جهاز تحليل آلي بالكامل أو مقياس الطيف الضوئي.
2- جهاز طرد مركزي.
3- أنبوب من الجل (مادة لتسريع التجلط).
4- الكواشف:
|
كاشف 1 كاشف منظم |
منظم تريس pH 7 |
100 ملي مول/ لتر |
|
ل-الأنين |
500 ملي مول/ لتر |
|
|
كاشف 2 |
ثنائي نوكليوتيد النيكوتين والأدنين المختزل (NADH) |
0.18 ملي مول/ لتر |
|
ركيزة |
نازعة الهيدروجين اللاكتاتية (LDH) أوكسوغلوتارات |
1200 وحدة/ لتر 15 ملي مول/ لتر |
التحضير:
قم بإذابة قارورة واحدة من الكاشف 2 في 3 مل من الكاشف 1 المنظم، يستقر هذا الكاشف العامل لمدة 13 يومًا عند درجة حرارة من 2 إلى 8 درجة مئوية أو لمدة 24 ساعة عند درجة حرارة من 20 إلى 25 درجة مئوية.
الإجراء:
- طول الموجة---------------------340 نانومتر.
- كاشف عامل 1 مل مخلوط بعينة قدرها 100 ميكرولتر وانتظر لمدة دقيقة واحدة.
- قم بقياس انخفاض الانطفاء كل دقيقة لمدة تتراوح من دقيقة إلى 3 دقائق.
الحساب:
Δ OD/دقيقة * 1750 = وحدة/لتر.
مراقبة الجودة:
1- عند بداية كل يوم قم بتفعيل مواد مراقبة الجودة على المجالات الطبيعية وغير الطبيعية (ضوابط رقابية عالية ومتدنية).
واعمل دائمًا على تفعيل مجموعة من الضوابط الرقابية بعد معايرة المحلل.
إذا كانت الضوابط خارجة عن النطاق، فلا تقم بتقديم نتائج المريض إلا بعد حل المشكلة حيث يتم إعادة تحليل عينات المريض باستخدام عينات مراقبة الجودة في إطار نطاق يمكن قبوله.
2- يتم التعبير عن التغير في صورة الانحراف المعياري ومعامل التغيير ويتم توضيحه من خلال مخطط بياني لتقييم الجودة يسمى Levy-Jennings graph.
قيمة مرجعية:
السيدات حتى 31 وحدة/لتر عند 37 درجة مئوية
الرجال حتى 40 وحدة/لتر عند 37 درجة مئوية
النتائج:
1- القيمة المرعبة: هي القيمة التي تبلغ ضعف أو ثلاثة أضعاف القيمة الطبيعية.
2- انتبه: القيمة المرجعية للإجراء النهائي تختلف عن القيمة المرجعية للإجراء الحركي.
القيود:
1- يمكن أن تسبب العينات التي يرتفع بها إجمالي البروتين وتسيطر عليها غلوبولينات غامانية زيادة ناقلات أمين الألانين.
ويجب تخفيف العينة بكمية معادلة من ملح متساوي التوتر ثم إعادة التحليل.
2- في المصل مرتفع الأنشطة، قد تكون الامتصاص الأولي منخفض للغاية نظرًا لاستهلاك معظم NADH قبل أول قراءات.
وفي هذه الحالة، قم بإعادة العينة بعد تخفيفها كما هو موضح أعلاه.
التسميات
معايير مختبرية