اختبار وظائف الكبد.. إجمالي بيليروبين المصل

يتكون البيليروبين من شدفة الهيم في الهيموغلوبين التي يصدرها خلايا الدم الحمراء.

ويعتبر النخاع العظمي والكبد والطحال مواقع إنتاج البيليروبين.

ويمكن تقسيم أسباب زيادة إجمالي البيليروبين إلى 3 فئات:

- قبل كبدي: ينتج عن حالات انحلال الدم المختلفة؛

- كبدي: ينتج عن الالتهاب الكبدي الوبائي وتليف الكبد والأسباب الأخرى للنخر الكبدي؛

- بعد كبدي: ينتج عن انسداد القناة المشتركة للصفراء أو القناة الكبدية الأصلية.

القاعدة:

يتفاعل حمض السلفانيليك مع نترات الصوديوم ليكونا حمض سلفانيليك ديازو.

وفي وجود ديمثيل سلفاوكيد، يتفاعل أجمالي البيليروبين مع حمض سلفانيليك ديازو ليكون أزوبيليروبين.

العينة:

1- ‎‎‎يوصى بأخذ عينة مقدارها 100 ميكرولتر من مصل الدم أو بلازما معالجة بالهيبارين.‎‎‎

قم بجمع العينات باستخدام أسلوب بزل الوريد القياسي. قم بحفظ العينات في حاويات مغلقة لتجنب حدوث تلوث أو تبخر.

اتبع الاحتياطات العالمية عند القيام بالفصد أو التعامل مع عينات المريض أو ما تم معيراته أو أي منتجات أخرى ذات علاقة بمصل الدم. تخلص من المواد الملوثة بالنفايات المسببة للعدوى.

2- قم بحماية العينات من الضوء والتحليل بأسرع ما يكون بعد عملية الجمع.

يتم تقديم تقرير عن التعرض المباشر لأشعة الشمس المباشرة كسبب في فقدان البيليروبين بنسبة 50% في ساعة واحدة، خاصة عندما يتم حفظ العينة في أنبوب شعري.

يمكن أن يسفر التعرض لضوء الغرفة العادي عن فقدان كمية كبيرة من بيليروبين مصل الدم بعد مرور فترة من ساعتين إلى 3 ساعات.

‌3- إذا لم يتم إجراء التحليل في الحال، يمكن تبريد العينات في الثلاجة لمدة تصل إلى 24 ساعة عند درجة حرارة (من 2 إلى 5) درجات مئوية.

4- قد يؤدي تعرض العينات المأخوذة من مسحات معقمة للكحول إلى انحلال كريات الدم الحمراء، وهو ما سيؤدي إلى زيادة قيمة البيليروبين.

5- إذا كان التركيز أكبر من مجال جهاز التحليل، فقم بتخفيف 5 كميات من ملح عادي ثم قم بإعادة التحليل.

ثم قم بضرب النتيجة في 6 للحصول على تركيز البيليروبين الإجمالي الأصلي.

وقد توضح النتائج انحرافًا إيجابيًا يصل إلى 30%.

 الكواشف والمواد:

1- مقياس الضوء الطيفي ومقياس البيليروبين لحديثي الولادة.

2- منبذة.

3- أنبوب من الجل (مادة لتسريع التجلط).

4- الكواشف:

كاشف 1	حمض السلفانيليك حمض الهيدروكلوريك ثنائي ميثيل سلفوكسيد	30 ملي مول/ لتر 150 ملي مول/ لتر 7 ملي مول/ لتر
كاشف 3	نترات الصوديوم	20 ملي مول/ لتر
كاشف 4	المعيار

الإجراء:

الكاشف العامل:

مزج

كاشف 1       20 حجم

كاشف 3       حجم واحد

الثبات في غياب الضوء 

6 ساعات عند درجة حرارة تتراوح من 20 إلى 25 درجة مئوية.

يومان عند درجة حرارة تزيد عن 4 درجات مئوية.

طول الموجة -------------- 555 نانومتر.

درجة الحرارة -------------  37 درجة مئوية.

القراءة مقابل عينة الكاشف 1 فارغة.

القراءة مقابل العينة والمعيار للكاشف 1 + الكاشف 3 (الكاشف العامل).

 المعايرة:

1- ‎‎تفريغ وغسيل الكفيت من خلال الضغط على (WASH) الموجود على شاشة LCD‎‎. سوف يحدث رجوع تلقائي لقائمة التحديد.

2- ‎‎ادفع كمية صغيرة من خلال الضغط على الرافعة (P) لتفريغ نظام الأنبوب.‎

لا تقم بسكب أي محلول.

3- قم بقياس 1000 ميكرولتر على وجه التحديد من الماء المقطر في كوب عينة ثم اسكب الماء المقطر بدفع كمية بالضغط على الرافعة [P]. سوف يتم تلقائيًا قياس 1000 ميكرولتر من حجم الكمية المسكوبة في الكفيت المتدفق.

4- سوف يتم عرض طول الانتقال الخاص بالهواء والماء على الشاشة.

5- اضغط [↵] لإنهاء عملية المعايرة.‎‎ سوف يعود البرنامج إلى قائمة تحديد الطريقة.

 مراقبة الجودة:

1- عند بداية كل نوبة عمل قم بتفعيل مواد مراقبة الجودة على المجالات الطبيعية وغير الطبيعية (ضوابط رقابية عالية ومتدنية)‎.

واعمل دائمًا على تفعيل مجموعة من الضوابط الرقابية بعد معايرة المحلل.

إذا كانت الضوابط خارجة عن النطاق، فلا تقم بتقديم نتائج المريض إلا بعد حل المشكلة حيث يتم إعادة تحليل عينات المريض باستخدام عينات مراقبة الجودة في إطار نطاق يمكن قبوله.

‌

2- يتم التعبير عن التغير في صورة الانحراف المعياري ومعامل الاختلاف ويتم توضيحه من خلال مخطط بياني لتقييم الجودة يسمى Levy-Jennings graph.

الإجراء:

الحسابات:

	عينة فارغة	عينة	معيارية فارغة	المعيار
عينة	50 ميكرولتر	50 ميكرولتر	-	-
المعيّر (الكاشف 4)	-	-	50 ميكرولتر	50 ميكرولتر
كاشف (R1)	1 مل	-	1 مل	-
الكاشف العامل	-	1 مل	-	1 مل

قم بمزج وقراءة الانطفاء بعد فترة تحضين تستغرق 5 دقائق في درجة حرارة 37 درجة مئوية

ثبات اللون ساعة واحدة (تجنب ضوء الشمس المباشر)

الحساب:

(عينة كثافة بصرية – عينة كثافة بصرية فارغة) / (معيّر كثافة بصرية – معيّر كثافة بصرية فارغ) * n

N = تركيز المعيار 

التخاطط:

تخاطط ما يصل إلى  20 ملجم / ديسيلتر، 340 ميكرومول/لتر

قيمة مرجعية:

- البيليروبين الإجمالي لمصل الدم: < 1 ملجم/ديسيلتر،  < 17 ميكرومول / لتر

- عامل. التحويل: ملجم/ ديسيلتر * 17.1 = ميكرومول / لتر

القيود:

1- يتعين عدم تحليل العينات المأخوذة من مرضى الغسيل الدموي فيما يتعلق بالبيليروبين الإجمالي.

2- يؤثر الهيموغلوبين في نتائج البيليروبين.

3- يمكن أن تؤدي المركبات التي تعمل على تغيير لون مصل الدم مثل حمض 4- أمينوساليسيليك إلى زيادة نتائج البِيليروبين بشكل غير صحيح.

4- قد تزيد نتائج البِيليروبين غير المقترن في الغالب (على سبيل المثال حديثى الولاة) عن نسبة 10% أكثر من الطريقة المرجعية.