صبغة جرام وتفاعل الكائنات الحية معها.. طبقات ببتيدوغليكان في البكتيريا موجبة الجرام

تصنف الكائنات الحية وفقًا لتفاعلها مع صبغة جرام.

تحتوي البكتيريا موجبة الجرام على طبقات ببتيدوغليكان أكثر سمكًا وأكثر كثافة في جدران خلاياها.

يخترق اليود جدران الخلية في هذه البكتيريا ويغير الصبغة الزرقاء ليمنع انتشارها من خلال جدران الخلية في أثناء عملية إزالة اللون.

يجب توافر بكتيريا موجبة الجرام جدران خليتها سليمة لإنتاج تفاعل موجب.

يتم صبغ الخلايا سلبية الجرام التي لا تحتفظ بالبنفسج الميثيل/ البلوري بلون متباين 26.

وقد يستخدم الأحمر المحايد أو صبغة الصفرانين أو الكربول فوكسين كلون متباين.

طريقة جرام لفحص اللطخات:

1- تُحضر اللطخة وتسخن بلطف حتى تثبت.

2- تغمر الشريحة بالبنفسج الميثيل/ البلوري 0.5% وتترك لمدة 30 ثانية.

3- تُميل الشريحة ويوضع عليها محلول اليود لوكول (1%) بقدر كافٍ لغسل الصبغة وتغطى بمحلول جديد من اليود وتترك للتفاعل لمدة 30 ثانية.

4- تُميل الشريحة وتغسل من اليود باستخدام إيثانول أو أسيتون ذات تركيز 95 - 100% حتى ينتهي اللون لتجف اللطخة.

5- تشطف بالمياه.

6- يوضع عليها ملون مباين 0.1% (أحمر محايد أو صبغة الصفرانين أو الكربول فوكسين) وتترك للتفاعل لمدة دقيقتين تقريبًا.

7- تغسل بالمياه وتجف اللطخة.

التفسير:

- النتيجة الإيجابية:

تلون الكائنات الحية موجبة الجرام بلون أرجواني / أزرق غامق.

- النتيجة السلبية:

تلون الكائنات الحية سلبية الجرام بلون قرنفلي / أحمر.

- مراقبة جودة الكائنات الحية:

قد يستخدم المستنبت المغذي الذي يحتوي على كائنات حية موجبة الجرام وسلبية الجرام لمراقبة الجودة.