مزرعة لعقدية مقيحة.. الاستعداد المناعي تجاه الباسيتراسين منخفض التركيز

مزرعة لعقدية مقيحة:

فور استلام قطعة القطن في المختبر، يجب فركها فوق ربع صفيحة آغار دموي، ولطخ باقي الصفيحة بواسطة حلقة سلكية معقمة.

يجب تحضير الآغار الدموي من مستنبت آغار قاعدي بدون غلوكوز (أو مع محتوى غلوكوزي قليل) مثل آغار فول صويا تربسيني (TSA).

وإن تحميض الغلوكوز بواسطة عقدية مقيحة يثبط إنتاج الحالة الدموية.

يمكن استخدام الدم من أي نوع، حتى الدم البشري (دم متبرع جديد) بتركيز 5%.

يجب ملء الصفيحات بعمق يتراوح من 4 إلى 5 مليمتر.

يفضل دم الأغنام لأنه لا يؤدي إلى انحلال دم بعض أنواع المستدمية المطاعمة ولا يعطي أي انحلال دم مع مولدات الإنزيمات المختلفة في المكورات المعوية البرازية.

ويمكن تحسين اكتشاف المستعمرات الحالَّة للدم بيتا واستعجال التعرف الظني لهم وذلك بوضع قرص كوتريموكسازول (كما يستخدم في اختبار الحساسية) وقرص باسيتراسين خاص قليل التركيز فوق منطقة التلم الأولية.

ونظرًا لأن العقدية المقيحة مقاومة ولأن البكتيريا الأخرى حساسة لكوتريموكسازول، فإن هذا القرص يحسن من تبصر انحلال الدم بيتا.

وستؤدي الحضانة داخل مرطبان به شمعة إلى اكتشاف العقديات الحالة للدم بيتا.

وهناك طريقة بسيطة لزيادة انحلال الدم وهي طعن سطح الآغار عموديًا بإدخال الحلقة بعمق داخل المستنبت لتحفيز نمو المستعمرات السطحية.

وبعد 18 ساعة من الحضانة في درجة حرارة تتراوح من 35 إلى 37 درجة مئوية ومرة أخرى بعد 48 ساعة، يجب فحص صفائح الدم للتحقق من وجود مستعمرات صغيرة (من 0.5 إلى 2 ملليمتر) محاطة بمنطقة واسعة نسبيًا من انحلال الدم الواضح.

وبعد الصبغ بصبغة غرام للتحقق من وجود مكورات إيجابية لصبغة غرام، يجب إرسال المستعمرات لمختبرات خاصة بالتعرف على العقديات المقيحة.

ولأغراض سريرية، فإن التعرف الظني على العقديات المقيحة يكون بناء على استعدادها المناعي تجاه الباسيتراسين منخفض التركيز.

ولهذا الغرض، يتم استخدام قرص تفريقي معين يحتوي على عدد يتراوح من 0.02 إلى 0.05 وحدة دولية من الباسيتراسين.

والأقراص العادية التي يتم استخدامها في اختبار الحساسية، مع محتوي من 10 وحدات، ليست مناسبة للتعرف.

وأي عقديات حالة للدم بيتا تُظهر أي منطقة تثبيط حول القرص يجب الإبلاغ عنها بوصفها عقديات مقيحة.

وإذا كانت مستعمرات انحلال الدم كثيرة بشكل كاف، فإن ظهور أو غياب منطقة تثبيت قد يتم رؤيته مباشرة من صفيحة آغار الدم الأولية.

وإذا كانت المستعمرات كثيرة نسبيًا، يجب التقاط واحدة أو اثنين منها من الصفيحة الأولية، ولطخها في صفيحة أخرى للحصول على نمو متمادي، بالإضافة إلى تغطية كل منطقة ملقحة بقرص باسيتراسين.

وبعد الحضانة طوال الليل، يحب الاطلاع على المزارع الثانوية للبحث عن مناطق تثبيط.

وفي بعض المختبرات، فإن هذا التعرف الظني يتم تأكيده من خلال الإظهار السيرولوجي سكريات عديدة معينة بجدران الخلايا.

ويمكن إجراء ذلك سواء بواسطة طريقة المرسبة التقليدية، أو بشكل أسرع باستخدام طاقم اختبار التراص المشترك السريع للشرائح أو اختبار تراص اللاتكس.

وإذا كان مرغوبًا، يمكن التعرف بشكل أكبر على العقديات الحالة للدم بيتا باستخدام بعض الاختبارات الفيزيولوجية البسيطة قد يتم رؤية مستعمرات دقيقة للعقديات الحالة للدم بيتا، والتي عندما تنموا ويتم تصنيفها سيرولوجيًا، تتفاعل مع المصل الضدي للمجموعة A.

وتلك العقديات لا تعتبر عقديات مقيحة ولا يصاحبها العدوى الخطيرة التي تسببها العقديات من الفصيلة A.

وفي الإبلاغ عن وجود عقديات مقيحة في مزرعة حلق، يجب إعطاء إجابة نصف كمية (نادر أو + أو + + أو + + +).

ويظهر في المرضى المصابين بالتهاب البلعوم العقدي نموًا ضخمًا في العقديات المقيحة، مع وجود مستعمرات فوق سطح الصفيحة بأكمله.

بينما تظهر صفيحات الحاملين أقل من 20 مستعمرة لكل صفيحة.

حتى المستعمرات النادرة للعقديات الحالة للدم بيتا يجب تأكيدها والإبلاغ عنها.

الجدول: تمييز العقديات الحالة للدم بيتا:

الأنواع	العنقودية المقيحة	العنقودية القاطعة للدر	المكورة المعوية البرازية المولدة للإنزيمات المختلفة	أخرى
تصنيف لانسفيلد	أ	ب	ج	د، هـ، و
انحلال الدم	β	βb	β	β
المنطقة حول قرص الباسيتراسين	+	0c	0c	d0
أغار الصفراء والإسكولين (النمو والتسويد)	0	+	+	0
اختبار CAMP العكسي	0	0	0	0
حساسية كوتريموكسازول	0	0	0	+
اختبارPYR	+	0	+	0

1- المكورة المعوية البرازية لمولدة للإنزيمات المختلفة لا تنتج انحلال الدم بيتا إلا في أغار دم الخيول

2- 5% غير محللة للدم.

3- 5% إيجابية.

4- 10% إيجابية.

5- نفس القرص كما هو الحال في طريقة كيربي- باور.

وPYR: Pyrrolidonyl-β-naphtylamide.