يوجد العامل الروماتويدي (RF) في أمصال المرضى الذين يعانون من التهاب المفاصل الروماتويدي ويُعتقد وجود أجسام مضادة IgM موجهة ضد الغلوبولين المناعي G الموجود بالمرضى.
RF عبارة عن أدوات اختبار تراص لاتيكس السريع لاكتشاف وجود (RF) في المصل البشري.
تغطى جسيمات لاتيكس RF باستخدام جاما غلوبولين المطهر خصيصا، عند خلط مستعلق اللاتيكس مع المصل الذي يحتوي على مستويات RF مرتفعة على الشريحة، يلاحظ وجود تراص خلال دقيقتين.
يتمتع RF بحد كشف يبلغ 8 وحدة دولية/مجم من RF في مصل المريض.
المادة:
1- مستعلق جسيمات لاتيكس البوليستيرين (حوالي 1.25%) مغطى بكسر IgG المعدل بطريقة مناسبة في دارئة الثبات.
2- عنصر التحكم الإيجابي. المصل المحتوي على أجسام مضادة للعامل الروماتويدي. قوة العمل.
3- عنصر التحكم السلبي. المصل الخالي من أجسام مضادة للعامل الروماتويدي.
4- محراك.
5- شريحة بلاستيكية.
6- الممصات الدقيقة قادرة على توزيع 50 ميكرو لتر.
7- محلول ملح مساوي التوتر (0.9% NaCI).
جمع العينات وتحضيرها:
الحصول على عينة من الدم الوريدي من المريض وترك الجلطة تتكون وتنكمش. قم بالطرد المركزي لعينة الدم المتخثر واحصل على مصل واضح. يتطلب عينات مصل جديدة.
لا تستخدم في الاختبار المصل الذي به انحلال الدم أو الملوث أو الدهني حيث أن ذلك سيؤثر عكسيًا على النتائج.
يخزن المصل في درجة حرارة تتراوح من 2 إلى 8 درجات مئوية لمدة 48 ساعة قبل الاختبار.
إذا لزم التخزين لمدة أطول، يخزن في درجة حرارة تبلغ –20 درجة مئوية لمدة 6 أسابيع.
يتعين خلط العينات المذابة قبل الاختبار.
لا تقم بتكرار عملية إذابة المتجمد من العينات حيث أن ذلك يتسبب في الحصول على نتائج كاذبة.
تحضير الكاشف:
تحضر جميع الكواشف عند درجة حرارة الغرفة (من 20 درجة إلى 25 درجة مئوية) وتُخلط برفق قبل الاستخدام.
لا تحدث الرغوة.
ينبغي تنظيف شريحة الاختبار تنظيفا جديدا قبل الاستخدام حيث أن آثار المنظف أو العينة السابقة قد تؤثر على النتيجة.
إجراء التنظيف الموصى به:
1- يتعين غمس البطاقات المستخدمة في محلول مطهر. اتبع مبادئ الجهاد المصنعة للمواد المطهرة.
2- يتعين فرك دوائر التفاعل بمادة غير أكالة لضمان إزالة الجسيمات اللاصقة الممكنة.
3- اشطف تمامًا بماء مطهر.
4- اترك بطاقة التفاعل لتجف.
5- قم برش البطاقات بمحلول كحولي بنسبة 70%.
6- اترك الكحول ليتبخر قبل إعادة الاستخدام.
إجراء المقايسة:
طريقة وصفية:
1- اترك كواشف الأدوات ومصل المريض ليصل إلى درجة حرارة الغرفة.
2- انقل 50 ميكرولتر من مصل المريض إلى دائرة الاختبار الموجودة على الشريحة.
3- قم بهز كاشف اللاتيكس ثم باستخدام القطارة أضف قطرة واحدة من المستعلق إلى دائرة الاختبار.
4- اخلط القطرات باستخدام محراك يستخدم لمرة واحدة يضمن تغطية دائرة الاختبار والخليط.
5- برفق وبتساوي، قم بهز شريحة الاختبار واستدارتها لمدة دقيقتين في الوقت الذي تفحص فيه شريحة الاختبار بحثا عن وجود التراص.
طريقة شبه كمية:
1- باستخدام محلول ملح مساوي التوتر، قم بتحضير مخففات تسلسلية لمصل المرضى (1/2، 1/4، 1/8، 1/16، 1/32، 1/64 وغيرها).
2- انقل 50 ميكرولتر من كل مخففات المصل إلى دائرة الاختبار الموجودة على الشريحة.
3- قم بهز كاشف اللاتيكس ثم باستخدام القطارة أضف قطرة واحدة من المستعلق إلى دائرة الاختبار.
4- اخلط القطرات باستخدام محراك يستخدم لمرة واحدة يضمن تغطية دائرة الاختبار والخليط.
5- برفق وبتساوي، قم بهز شريحة الاختبار واستدارتها لمدة دقيقتين في الوقت الذي تفحص فيه شريحة الاختبار بحثا عن وجود التراص.
النتائج والتفسير:
افحص شريحة الاختبار تحت مصدر ضوء قوي بعد دقيقتين. من خلال دور اختبار، يتعين اختبار عناصر تحكم الأدوات وعينات قيم المستوى المعروفة.
من المفترض أن يعطي عنصر التحكم السلبي للأدوات نتيجة سلبية بعد دقيقتين.
من المفترض أن يعطي عنصر التحكم الإيجابي للأدوات نتيجة إيجابية عند العيار 1/4 +/- مخفف واحد مزدوج بعد دقيقتين.
إن لم تعط مستويات عناصر التحكم أو عينات المستخدمين المعروفة النتائج المتوقعة، يتعين اعتبار نتائج الاختبار غير صالحة.
طريقة وصفية :
النتيجة الإيجابية يشار إليها من خلال نمط تراص واضح للاتيكس، في محلول واضح.
النتيجة السلبية يشار إليها من خلال عدم وجود تغير في مستعلق اللاتيكس على شريحة الاختبار.
يتم الحصول على النتائج الإيجابية عندما يبلغ تركيز مصل RF 8 وحدة دولية/ملليلتر أو أكثر وتكون النتائج السلبية عندما يكون تركيز RF أقل من 8 وحدة دولية/ملليلتر.
طريقة – شبه كمية:
بعد ذلك، يحسب تركيز RF بالمصل بالتقريب من خلال مضاعفات عامل المخفف (أي 2 أو 4 أو 8 أو 16) أو من خلال حد الكشف وهو 8، لتعطي قيمة تركيز تبلغ وحدة دولية/ميكرولتر، على سبيل المثال إذا كان عيار التراص عند 1/8، فإن القيمة التقريبية لتركيز RF بالمصل تكون 8 × 8 = 64 وحدة دولية/ميكرولتر.
تم الكشف عن عيارات بقيمة 1074 وحدة دولية/ميكرولتر من خلال Avitex RF مع عدم وجود تأثير للبروزون (الصنارة)..
التسميات
معايير مختبرية