اختبار ميلون: الكشف عن التيروسين والمركبات الفينولية - المبادئ، المواد، والطريقة

ما هو اختبار ميلون؟

اختبار ميلون هو اختبار كيميائي يستخدم للكشف عن وجود التيروسين، وهو حمض أميني يحتوي على مجموعة الفينيل الهيدروكسية (C6H4OH). ومع ذلك، فإن هذا الاختبار ليس خاصًا بالتيروسين فقط، بل يمكن أن يعطي نتائج إيجابية مع أي مركب فينولي لا يحتوي على بدائل في الموضعين 3 و 5، مثل الفينول العادي أو الثيمول.

هدف الاختبار:

• التعرف على وجود التيروسين في العينة.
• الكشف عن المركبات الفينولية.

مبدأ الاختبار:

• يتفاعل التيروسين مع كاشف ميلون (كبريتات الزئبق في حمض الكبريتيك) لتكوين مركب أحمر اللون.
• يجب أن يكون المحلول حمضيًا، وإلا سيترسب هيدروكسيد الزئبق.

المواد المستخدمة:

• محلول ميلون (كبريتات الزئبق 15% في حمض الكبريتيك 15%).
• محلول نتريت الصوديوم 1%.
• محلول الحمض الأميني (العينة المراد اختبارها).

طريقة الاختبار:

• أضف 5 قطرات من محلول ميلون إلى 1 مل من محلول الحمض الأميني.
• قم بتسخين المزيج في حمام مائي مغلي لمدة 10 دقائق.
• برد المزيج إلى درجة حرارة الغرفة.
• أضف 5 قطرات من محلول نتريت الصوديوم.
• لاحظ ظهور لون أحمر غامق، مما يشير إلى وجود التيروسين أو مركب فينولي آخر.

ملاحظات هامة:

• يجب التعامل مع كاشف ميلون بحذر، حيث أنه يحتوي على مواد كيميائية سامة.
• يجب إجراء الاختبار في بيئة جيدة التهوية.
• يجب الانتباه إلى أن هذا الاختبار لا يقتصر على الكشف عن التيروسين بل يكشف المركبات الفينولية، وبالتالي يجب تأكيده بعمل اختبارات أخرى للبروتينات مثل اختبار بيوريت أو تفاعل نينهيدرين.