اختبار نينهيدرين: رحلة في عالم الأحماض الأمينية والبروتينات
مقدمة:
يُعد اختبار نينهيدرين أداةً كيميائية قيّمة في مجال الكيمياء الحيوية، حيث يُستخدم للكشف عن وجود الأحماض الأمينية والبروتينات في مختلف العينات.
هدف الاختبار:
- التعرف على الأحماض الأمينية من نوع ألفا: يتميز اختبار نينهيدرين بقدرته على تمييز الأحماض الأمينية من نوع ألفا عن غيرها من المركبات النيتروجينية. تتفاعل هذه الأحماض مع نينهيدرين لتكوين مركب ملون بنفسجي، بينما تنتج البروتينات أو الببتونات والببتيدات والأمينات العادية وكذلك النوشادر لونًا بنفسجيًا فقط.
فكرة الاختبار:
تفاعل متعدد الخطوات: يتكون اختبار نينهيدرين من سلسلة من التفاعلات الكيميائية التي تتضمن:
- تفاعل الأحماض الأمينية مع نينهيدرين: يتفاعل نينهيدرين مع الأحماض الأمينية في بيئة قلوية (pH 8-4) لتكوين هيدرين دانتين وثاني أكسيد الكربون والنوشادر وسلسلة جانبية (RCHO).
- تكوين المركب الملون: يتفاعل هيدرين دانتين مع النوشادر ومزيد من نينهيدرين لتكوين مركب ملون بنفسجي.
المواد:
- محلول نينهيدرين: 2 جم/ لتر (يتم تحضيره حديثًا).
- الأحماض الأمينية: جليسين، تيروسين، تريبتوفان (1 جم/ لتر لكلٍ منها).
الطريقة:
تحضير عينة الاختبار:
- خذ 1 مل من محلول الحمض الأميني في أنبوبة اختبار.
- اضبط pH المحلول ليكون متعادلاً.
إجراء الاختبار:
- أضف 5 قطرات من محلول نينهيدرين إلى أنبوبة الاختبار.
- سخن أنبوبة الاختبار للغليان لمدة دقيقتين.
الملاحظات:
- لاحظ اللون المتكون في أنبوبة الاختبار.
- لاحظ أيضًا أي فقاعات غازية تتكون (تشير إلى ثاني أكسيد الكربون).
التفسير:
- اللون البنفسجي: يشير وجود لون بنفسجي إلى وجود حمض أميني من نوع ألفا.
- فقاعات غازية: تؤكد فقاعات ثاني أكسيد الكربون وجود تفاعل كيميائي بين الحمض الأميني ونينهيدرين.
ملاحظات هامة:
- اختبار نينهيدرين حساس للغاية: يمكنه الكشف عن كميات ضئيلة من الأحماض الأمينية.
- اختبار غير محدد: لا يمكنه تمييز حمض أميني واحد عن آخر.
- اختبار سهل الاستخدام: لا يتطلب معدات معقدة أو مهارات تقنية عالية.
تطبيقات اختبار نينهيدرين:
- تحليل البروتينات: يمكن استخدام اختبار نينهيدرين لتحديد كمية البروتين في عينة.
- الكشف عن البصمات: يتفاعل عرق الإنسان مع الأحماض الأمينية، ويمكن استخدام اختبار نينهيدرين للكشف عن هذه الأحماض الأمينية في بصمات الأصابع.
- دراسات التغذية: يمكن استخدام اختبار نينهيدرين لتقييم محتوى الأحماض الأمينية في الأطعمة.
خاتمة:
- يُعد اختبار نينهيدرين أداةً قيّمة للكشف عن الأحماض الأمينية والبروتينات في مختلف المجالات.
- بفضل بساطته وفعاليته، يُستخدم على نطاق واسع في البحوث والتطبيقات العملية.
التسميات
أحماض أمينية